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冰冻切片包埋剂制备时的注意事项
来源于:上海联硕生物科技有限公司,浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2024/1/2 17:19:00

1、速冻是冰冻切片的关键,因为只有速冻才能减少组织内的冰晶,最好的办法就是将速冻头迅速压在组织上,切好后就可以冻片,特别适用于较脆的组织。
2、固定切片后应立即放入甲醇冰醋酸中固定,不能等切片干后再固定,后者容易造成细胞退变。固定液有很多种,甲醇作用快、收缩小、染色较清晰,是冰冻切片最理想的固定液,而每97ml加入冰酸醋3ml,会减少某些胶质、钙质较多的组织不容易掉片。
3、包埋剂可用普通胶水代替,但要加入适量的水(胶水与水的比例大约在2:1)。
太稀了容易损伤切片刀,太稠了黏在刀上不容易洗掉,影响切片的质量。
4、冰冻用切片刀不仅要磨得快,而且要磨得直,否则切出来的片子就会不平整,不能进入抗卷板(最好使用一次性刀片)。
5、如组织发脆,可以等几分钟后再切,也可用手在组织上稍微加温;如果用手去摸组织块,最好戴手套,或用玻片间的纸夹在手与组织之间,以防感染。
6、冷冻室的室温冬天一般设置在-19℃左右,夏天设置在-22℃左右。
不同的组织有不同的温度要求,如肝脏、甲状腺组织温度应设置在-15℃左右,脂肪组织一般设置在-35℃以下。
7、冷冻切片机应长期处于恒温冷冻状态,经常的开关电源容易造成设备损坏。

*以上内容来自网络

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