酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay，ELISA）是免疫学和分子生物学中广泛使用的实验室技术，由Eva Engvall和 Peter Perlmann 于1971年首次描述。该测定依赖于抗原-抗体相互作用的原理，并利用酶和比色检测来量化目标分子，主要用于检测和量化生物样品中特定蛋白质、肽、抗体或抗原的存在。ELISA测定通常应用于各个领域，包括临床诊断、药物研究和生命科学基础研究。

在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种：

直接ELISA：抗原通过一段时间的孵育被动地附着在塑料固相载体上，经过简单的洗涤后，通过添加与酶共价连接的抗体来检测抗原。孵育和洗涤后，通过添加色原/底物使酶活性产生颜色变化来显色。在规定的时间后通过化学手段终止酶活性后读取显色情况。在分光光度计中读取颜色。该方法相对简单，但它在灵敏度方面可能存在局限性，特别是当抗体-抗原相互作用相对较弱时。

间接ELISA：间接ELISA是在直接ELISA的基础上添加酶标二抗进行检测。抗原通过孵育被动附着到孔上，洗涤后，将抗原特异性抗体（一抗）与抗原一起孵育。 清洗孔并通过添加与酶共价连接的抗物种抗体（二抗）来检测结合的抗体。二抗对于产生所添加的第一抗体的物种具有特异性。