脂质体的制备方法
来源于:上海联硕生物科技有限公司,浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2024/11/20 17:22:00
脂质配方的性质取决于具体成分(阳离子、阴离子和中性脂质)。
但是,同一种制备方法适用于所有成分的脂质囊泡。制备流程的一般要素包括制备用于水合的脂质、搅拌水合以及减小粒径,从而获得均匀分布的囊泡。
今天介绍制备用于水合的脂质:
当用混合脂质成分制备脂质体时,必须先溶解脂质并混合于有机溶剂中,以确保获得均匀的脂质混合物。
通常,该过程使用氯仿或氯仿:甲醇混合液完成。
目的在于使脂质完全混合,获得澄清的脂质溶液。
一般情况下,脂质溶液的制备浓度为10-20mg脂质/ml有机溶剂,但是,在脂质溶解度和混合程度可接受的情况下,也可使用更高浓度。
一旦脂质充分混合于有机溶剂中,则除去溶剂以产生脂质薄膜。如有机溶剂较少(< 1mL),可在通风橱内使用干燥氮气流或氩气流蒸发溶剂。
如有机溶剂较多,应通过旋转蒸发除去有机溶剂,从而在圆底烧瓶内壁形成脂质薄膜。
将样品瓶或烧瓶放在真空泵上过夜,去除残留有机溶剂,使脂质薄膜完全干燥。如果对使用氯仿有异议,也可以选择使用叔丁醇或环己烷溶解脂质。
将脂质溶液转移到容器中,并将容器放在干冰块上或在干冰-丙酮或酒精(乙醇或甲醇)浴中旋转,使其冻结。
使用酒精浴时,应确认容器能够承受突然的温度变化而不发生破裂。
随后,将完全冻结的脂质结块放到真空泵上冻干,直至完全干燥(1-3天,具体取决于溶剂体积)。
脂质结块的厚度不应超过冻干容器的直径。
干燥的脂质薄膜或结块可从真空泵上取下,将容器牢固密封并冷冻储存,直至用于水合。
*以上内容来自网络
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