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冻融血清沉淀物是否影响血清品质?
来源于:上海联硕生物科技有限公司,浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2021/1/8 13:44:00

做细胞培养实验经常会用到血清,当血清用不完我们会冻起来下次再次使用。但你有没有发现有时候在融化血清过程中会出现白色的沉淀物质,出现这种情况是否血清出现问题了呢?

首先我们要搞清楚血清中絮状沉淀物是什么,沉淀物其实包含含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。

那怎么才能降低沉淀物的发生呢?

(1)解冻血清/分装冻存时,须规则摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。

(2)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。

(3)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。

使用时常见问题及解决方法:

一、保存血清最-好的方法:

血清应保存在-5℃至-20℃若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

二、如何解冻血清才不会使产品质量受损?

将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

三、如何避免沉淀物的产生?

1.解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。

2.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。

3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。

4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。

5.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。

四、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?

欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。

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