
英文名:2*Taq MasterMix(With dye)
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产品别名:
2×Taq MasterMix中的Taq DNA Polymerase是从克隆有突变改造Thermus aquaticus DNA Polymerase基因的载体在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来,其分子量是94 kD。具有5'→3' DNA聚合酶的活性以及5'→3'外切核酸酶活性,能校对DNA扩增过程中产生的碱基错配,保真性是普通Taq酶的8倍。在PCR反应中,Taq DNA Polymerase聚合的延伸速度为1kb/min,PCR产物3'端为A,可直接用TA载体克隆。该产品优于市面上的ExTaq 和LA Taq ,建议扩增长度100bp-15kb。本品含蓝色指示染料,跑胶无需额外添加loading buffer直接上样,在胶上位置相当于200bp位置。
为克服低效率扩增或不扩增,以下意见可供参考:
1. 优化退火温度。一般TM值减5℃,高于60℃以上建议使用60℃;减少反应过程中的扩增抑制剂。DNA模板中可能含有扩增抑制剂,减少模板的量提高扩增效率或提纯模板DNA的纯度。
2. 减少反应过程中的扩增抑制剂。DNA模板中可能含有扩增抑制剂,减少反应体系中模板的量提高扩增效率。
3. 提高模板DNA的纯度和浓度。
4. 增加添加物。添加PCR增强剂(如DMSO 或Btaine)可以提高扩增效率,添加稳定剂(如BSA)能帮助克服扩增失败。
产品用途:常规PCR扩增、TA克隆、复杂模板扩增、高GC模板扩增等。
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